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吸光度測(cè)量使用設(shè)備簡(jiǎn)單、操作便捷。大部分無(wú)機(jī)物和有機(jī)物都可以直接地或間接地用吸光光度法測(cè)量。吸光度測(cè)量主要用于液體或氣體的定量分析，廣泛應(yīng)用于環(huán)境監(jiān)測(cè)、化學(xué)分析、檢驗(yàn)檢測(cè)等領(lǐng)域。

1.       吸光度定義

用單色光照射某一吸光物質(zhì)或溶液，測(cè)量單色光照射前的強(qiáng)度（即入射光強(qiáng)度I0）以及透過(guò)吸光物質(zhì)后的強(qiáng)度（即透射光強(qiáng)度I），定義透光度（transmittance）T 為

定義吸光度（absorbance）A為

2.       光的吸收定律

朗伯-比爾（Lambert-Bear）定律，也稱光的吸收定律，是吸光度定量分析的基本關(guān)系式。其數(shù)學(xué)表達(dá)式為：

為摩爾吸光系數(shù)，與溶液的性質(zhì)、溫度和入射光波長(zhǎng)有關(guān);

b為溶液光程長(zhǎng)度，即為比色皿的尺寸，單位為cm;

c 為溶液濃度，單位為mol/L。

公式表明當(dāng)溶液入射光波長(zhǎng)和光程長(zhǎng)度固定不變時(shí)，吸光度與溶液濃度成正比關(guān)系。在測(cè)試未知樣品的濃度的實(shí)驗(yàn)中，可以測(cè)量數(shù)組已知確定樣品濃度和吸光度的數(shù)據(jù)，構(gòu)建吸光度與樣品濃度的正比關(guān)系式，通過(guò)測(cè)量未知樣品的吸光度來(lái)求解未知樣品的濃度。

3.       吸光度測(cè)量整套儀器搭建方案

整套儀器由微型光纖光譜儀（含軟件）、光源、比色皿支架和光纖跳線組成，見(jiàn)下圖。

具體配置清單：

4.儀器介紹

4.1.  微型光譜儀

RGB-ER-CL微型光譜儀采用交叉非對(duì)稱C-T光路結(jié)構(gòu)，配置先進(jìn)的CMOS探測(cè)器，是一款結(jié)構(gòu)緊湊、攜帶方便的通用型微型光纖光譜儀，適用于科研及工業(yè)生產(chǎn)的光譜測(cè)量應(yīng)用，具有高靈敏度、高分辨率、高量子效率和高動(dòng)態(tài)范圍的特點(diǎn)。

RGB-ER-CL微型光譜儀響應(yīng)范圍為200～1000nm，狹縫為25μm，分辨率為1.5nm。

RGB-VIS-NIR-CL的波長(zhǎng)范圍為400～1100nm，狹縫為25μm，分辨率為1.0nm。用戶也可以選擇不同的光柵配置，得到不同的光學(xué)分辨率和光譜響應(yīng)范圍，以滿足不同的應(yīng)用需求。另外針對(duì)其它波段如200～900nm/200～1000nm/300～1100nm/700～1100nm等可以提供定制。

該款微型光譜儀免費(fèi)提供配套光譜測(cè)量軟件KewSpec。軟件包含查看、保存、讀取光譜圖和數(shù)據(jù)，以及積分時(shí)間、Boxcar平滑和信號(hào)平均等信號(hào)處理等基本功能，還包含光譜測(cè)量、吸光度、透過(guò)率、反射率等應(yīng)用測(cè)量模式。操作界面簡(jiǎn)潔明了，易于上手。

4.2. 光源

吸光度測(cè)量常見(jiàn)于紫外-可見(jiàn)波段，根據(jù)待測(cè)樣品的特征波長(zhǎng)范圍選擇合適的光源。

HLS-1鹵鎢燈光源波長(zhǎng)范圍360~2500nm，可直接出光或也可由SMA905端口連接光纖耦合輸出。輸出光強(qiáng)度可調(diào)，光源前端設(shè)有支架，可根據(jù)需要安裝濾光片或衰減片。

DLS-1氘-鹵鎢燈是一款可提供190~2500nm的紫外-可見(jiàn)-近紅外波段連續(xù)輸出光譜的一體化復(fù)合光源。采用SMA905端口連接光纖輸出，輸出光功率穩(wěn)定。氘燈和鹵鎢燈可分別開(kāi)啟，鹵鎢燈輸出光功率可調(diào)，用以搭配氘燈輸出光強(qiáng)。光源前端設(shè)有支架，可根據(jù)需要安裝濾光片或衰減片。

4.3.       比色皿支架

CH-4四向比色皿支架是常用的光譜測(cè)量附件，光程長(zhǎng)度1cm，支架的四面均連接一個(gè)CL-UV準(zhǔn)直透鏡。用于吸光度測(cè)量時(shí)，光纖接在兩個(gè)相對(duì)的準(zhǔn)直透鏡。

4.4.       光纖跳線

KEWLAB提供各種波長(zhǎng)范圍、光纖芯徑和長(zhǎng)度的光纖跳線，廣泛應(yīng)用于光譜分析領(lǐng)域。該光纖跳線具有堅(jiān)實(shí)耐用、穩(wěn)定性高、傳輸損耗小等特點(diǎn)。連接光源、微型光譜儀，起到傳輸光譜信號(hào)的作用。根據(jù)客戶的實(shí)際應(yīng)用需求，可選擇不同型號(hào)的光纖跳線。

光纖跳線覆蓋光譜范圍：190-2200nm

光纖芯徑可選范圍：200、400、600、1000μm等

標(biāo)準(zhǔn)長(zhǎng)度：0.5m、1m、2m，其它長(zhǎng)度可定制

外殼材料：金屬或塑料

5.       實(shí)測(cè)案例

以HLS-1鹵鎢燈為光源，使用RGB-VIS-NIR-CL微型光譜儀（400-1100nm）搭配整套設(shè)備測(cè)試不同濃度胭脂紅色素的吸光度光譜曲線。